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摘要
目的应用蛋白质组学方法筛选脑死亡状态下肝脏的差异蛋白,为肝脏供体质量评估提供实验依据。方法健康雄性新西兰家兔60只,随机分为脑死亡和假手术2个大组,每组30只,每个大组再分为2 h、6 h和8 h三个时间亚组,每组10只。各组分别于处理后2、6及8 h收集血液及肝脏组织,生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,HE染色观察肝脏的形态学改变。用双向凝胶电泳、胶图分析、质谱分析及NCBI数据库筛查并鉴定差异蛋白。结果脑死亡8 h血清ALT水平较6 h升高(P<0.05),AST水平随脑死亡时间延长无明显改变(P>0.05);假手术组不同时间点ALT、AST水平差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下,随着时间延长,脑死亡组家兔肝脏水肿及汇管区炎性细胞浸润逐渐增加,8 h时出现中性粒细胞微脓肿,肝细胞受损不明显;实验8 h脑死亡家兔胆管区以淋巴细胞浸润为主,假手术组以中性粒细胞浸润为主。通过双向凝胶电泳、质谱分析及数据库查询,发现脑死亡组与假手术组共存在10种差异表达蛋白。其中一种差异蛋白与物质代谢密切相关,为线粒体醛脱氢酶,其在脑死亡组表达降低。结论脑死亡可以导致家兔肝脏形态学方面的粗略改变,而功能学无明显改变。线粒体醛脱氢酶可能参与了脑死亡后肝脏损伤的发生和发展,有望成为脑死亡状态下家兔肝脏质量评估的新指标。
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