摘要
目的观察铁转运蛋白(FPN)在非小细胞肺癌(NSCLC)中差异表达及探讨FPN作用NSCLC细胞迁移与增殖的机制。方法免疫组化(IHC)检测肺癌标本(60例)及正常肺组织标本(20例)FPN表达水平。蛋白免疫印迹(Westem blot)检测细胞系中FPN表达水平。分别构建FPN过表达体系(PCDH-FPN-F)和敲低体系(shFPN),通过Westem blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。划痕实验检测FPN对肺癌细胞迁移的影响。生长曲线法检测FPN对肺癌细胞增殖能力的影响。结果相比于正常肺组织,肺癌组织标本中FPN表达显著降低(P=0.000);相比于正常肺细胞系,肺癌细胞系中FPN表达量显著降低(P<0.000 1)。与对照组比较,过表达组FPN表达量显著升高(Westem blot:P<0.01,qRT-PCR:P<0.000 1);与对照组比较,敲低组FPN表达量显著降低(Westem blot:P<0.001,qRT-PCR:P<0.001)。过表达FPN后,细胞划痕间伤口愈合距离在18 h和36 h明显低于对照组;细胞数目在第2天和第4天明显低于对照组。而敲低FPN后,细胞划痕间伤口愈合距离在18 h和36 h明显高于对照组;细胞数目在第2天和第4天明显高于对照组。结论低表达FPN后,肺癌细胞迁移及增殖能力增强,这可能是肺癌中FPN差异表达的原因。
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