新型CpG-ODN佐剂增强灭活HAdV-55抗原在BALB/c小鼠体内的免疫应答

作者：冯意; 江洁; 刘莹; 马若群; 蔡建林; 曹蕾; 李海; 任虎; 朱贞; 崔爱利; 张燕; 许文波; 毛乃颖^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2022, 36(04): 409-416.

• 人腺病毒55型
• 免疫原性
• CpG寡聚脱氧核苷酸

目的评价人工合成CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide, CpG-ODN)作为佐剂对灭活人腺病毒55型(human adenovirus type 55, HAdV-55)抗原诱导BALB/c小鼠免疫应答的影响。方法 HAdV-55 QS原型株经噬斑纯化构建疫苗候选株种子库, 将疫苗候选株扩增产物经0.05% β-丙内酯灭活, 纯化后制备成全病毒颗粒抗原。纯化HAdV-55抗原按低剂量组(0.2 mg/ml)和高剂量组(1 mg/ml)分别与CpG-ODN和氢氧化铝佐剂等体积混合, 乳化后接种BALB/c小鼠, 同时设PBS对照组, 间隔21 d加强免疫1次。分别在初次免疫后21 d和35 d采集小鼠静脉血并分离血清, 采集末次血清时分离小鼠脾脏淋巴细胞。通过酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和微量中和试验检测免疫后小鼠血清中HAdV-55特异性IgG抗体和中和抗体水平, 酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay, ELISpot)检测小鼠分泌IL-4和IFN-γ细胞因子淋巴细胞水平。结果无论有无佐剂, 随着免疫次数和接种剂量的增加, 灭活HAdV-55抗原诱导BALB/c小鼠产生的病毒特异性IgG抗体显著升高;而中和抗体只有在加强免疫后才能达到可检测水平, 中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)在1:11～1:23之间;使用不同佐剂对小鼠免疫应答有显著影响, 低剂量抗原联合CpG-ODN和氢氧化铝混合佐剂可诱导小鼠产生较高的体液免疫和细胞免疫应答, 其特异性IgG抗体和中和抗体水平分别是单独使用氢氧化铝佐剂组小鼠的2.2和1.8倍, 分泌IFN-γ淋巴细胞数是其2.3倍。结论新型CpG-ODN佐剂免疫能显著提高灭活HAdV-55全病毒抗原在BALB/c小鼠体内的免疫原性, 同时使细胞免疫应答向偏向Th1型。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所