摘要

目的 :研究miR-199a对人风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖、侵袭和炎症因子分泌的影响及其机制。方法 :将miR-199a mimics或/和pcDNA3.1-CSRP2转染至MH7A细胞,再以100 mg/L脂多糖(LPS)处理。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-199a、富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2(CSRP2)的表达,用CCK-8法检测细胞增殖,用Transwell法检测细胞侵袭,用酶联免疫吸附(ELISA)检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,用免疫印迹检测细胞中CSRP2、p21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白水平;采用双荧光素酶报告实验检测细胞的荧光活性。结果 :与对照组相比,LPS组MH7A细胞中miR-199a、p21、E-cadherin的蛋白表达显著降低,细胞增殖、侵袭和IL-6、TNF-α的含量均显著升高,差异有统计学意义;与LPS组相比,LPS+miR-199a组以上各指标均被逆转,差异有统计学意义。miR-199a可靶向负调控CSRP2的表达。过表达CSRP2能够部分逆转miR-199a对LPS诱导的MH7A细胞增殖、侵袭和炎症因子分泌的影响。结论 :miR-199a抑制LPS诱导的MH7A细胞的增殖、侵袭和炎症反应,其机制可能与靶向CSRP2有关。

  • 单位
    大连市第三人民医院