IKCa1通道对HeLa细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响

作者：程慧; 高兰阳; 詹平; 毛熙光

来源：山东医药, 2017, 57(41): 24-27.

• 宫颈肿瘤
• HeLa细胞
• IKCa1通道
• 细胞迁移
• 侵袭
• 微小RNA

目的探讨钙激活钾离子(IKCa1)通道对宫颈癌He La细胞迁移、侵袭及miRNA表达谱的影响。方法取生长期He La细胞,随机分为观察15组及DMSO组,分别给予0、10.0、20.0、30.0、40.0μmol/L TRAM-34及等体积DMSO(TRAM-34溶剂)处理24、48和72 h,用划痕实验检测He La细胞迁移特性;用Transwell侵袭实验检测48 h细胞侵袭特性。用高通量测序法检测IKCa1通道阻断前后miRNA表达谱的差异,并用qRT-PCR法对部分差异表达miRNAs进行验证。运用miRanda软件预测差异miRNA可能调控的靶基因,并对这些靶基因进行通路富集分析。结果划痕实验,TRAM-34干预后He La细胞迁移受抑制,随着TRAM-34浓度增加及作用时间延长,抑制迁移作用越明显(P<0.001)。Transwell侵袭实验显示,He La细胞的侵袭率随TRAM-34浓度增加呈递减趋势(F=384.050,P<0.001)。通过高通量测序筛选出15个差异有统计学意义而表达上调的miRNA,5个表达下调的miRNA。qRT-PCR结果显示差异性miRNA的表达趋势与测序结果一致。生物信息学分析发现,hsa-miR-143-5p的靶基因在癌症相关通路、p53基因信号通路及MAPK信号通路上出现聚集;而hsa-miR-421的靶基因在肿瘤蛋白多糖、Rap1信号通路和Wnt信号通路出现聚集。结论阻断IKCa1通道可抑制He La细胞迁移和侵袭,影响miRNAs表达谱。

• 单位
  西南医科大学