葛根素治疗冠状动脉支架内再狭窄的核心靶点筛选与细胞学验证

作者：孙云雷; 曹月娟^*; 赵振营

来源：山东医药, 2023, 63(26): 10-14.

• 冠脉支架内再狭窄
• 葛根素
• 网络药理学
• 过氧化物酶体增殖物激活受体γ
• 血管平滑肌细胞
• 细胞增殖

目的 基于网络药理学、分子对接的方法筛选葛根素治疗冠状动脉支架内再狭窄（ISR）的核心靶点，并通过细胞学实验验证相关靶点。方法 在NCBI公共数据平台基因表达综合数据库（GEO）中下载基因表达谱芯片数据GSE46560，使用R语言软件筛选该基因表达谱的差异基因，与Genecard数据库中ISR相关靶点整合，获得ISR疾病靶点。在TCMSP、SwissTargetPrediction网站下载葛根素的作用靶点，与ISR疾病靶点交集，获得药物—疾病关键靶点；使用String网站和Cytoscape软件分析蛋白—蛋白相互作用网络并筛选出核心靶点；使用AutoDockvina软件将核心靶点与葛根素的三维核心活性成分结构进行分子对接，计算分子对接核能值，评价配体分子与受体蛋白的结合能力。取大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞进行培养，将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+葛根素组，采用细胞划痕实验观察各组6、12、24、48 h细胞迁移率；采用Western blotting法检测各组细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达；采用ELISA法检测细胞炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量。结果 共获得ISR疾病相关靶点528个、葛根素作用靶点142个，将二者取交集，获得药物—疾病关键靶点56个。将56个疾病—药物关键靶点输入String11.5网站，获得疾病—药物核心靶点TNF、AKT1、SOD1、VEGFA、ABCB1、CASP3、PTGS2、PPARγ。分子对接显示，各核心靶点蛋白与葛根素中对应的活性化合物均有较好的结合能力。细胞实验表明，与空白对照组比较，AngⅡ组PPARγ蛋白表达降低，TNF-α、IL-6表达升高；与AngⅡ组比较，AngⅡ+葛根素组PPARγ表达升高，TNF-α、IL-6表达降低。结论 共筛选得到PPARγ等7个葛根素治疗ISR的核心靶点；经验证，葛根素可能通过激活PPARγ、抑制炎症因子表达从而抑制血管平滑肌细胞增殖，从而达到治疗ISR的目的。

• 单位
  天津中医药大学; 天津市人民医院