欧洲型PRRSV竞争ELISA抗体检测方法的建立及应用

作者：许浒; 相丽润; 张文立; 汤艳东; 赵静; 李超; 龚邦俊; 李宛生; 付军; 彭金美; 王倩; 周国辉; 冷超粮; 安同庆; 蔡雪辉^*; 张洪亮^*; 田志军^*

来源：中国预防兽医学报, 2022, 44(06): 617-623.

• 1型猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 竞争ELISA
• 流行病学调查

为快速准确地监测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV-1）在我国的流行情况，本研究以分子筛纯化灭活的PRRSV-1(ZD-1株)为包被抗原，利用PRRSV-1的特异性单克隆抗体（MAb EU-1）为竞争抗体，经条件优化，建立了检测PRRSV-1的竞争ELISA(EU-C-ELISA)方法。反应条件优化结果显示，最佳抗原包被量为455 ng/孔，PRRSV-1 MAb EU-1的最佳稀释度为1:8。EU-C-ELISA结果判定标准：血清样品抑制率PI≥45%时判定为阳性，PI<45%判定为阴性。特异性试验结果显示，该方法仅能检测PRRSV-1阳性血清，与各谱系PRRSV-2及其他常见猪病毒和细菌阳性血清均无交叉反应；敏感性试验结果显示，该方法能检测出16倍稀释的阳性标准血清，并且最早可在PRRSV ZD-1株感染猪后第7 d检测到血清中PRRSV-1抗体阳转；批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%，对比试验结果显示该方法特异性和敏感性均显著优于现有试剂盒对PRRSV-1抗体的检测。利用该方法对2020年采自黑龙江、辽宁、河北、山东省10个猪场的432份临床血清样品进行检测，2个猪场检出PRRSV-1抗体阳性，猪场阳性率达20%，样品总阳性率为15.0%，显示PRRSV-1抗体已存在于我国部分地区猪群中。本研究在我国首次建立了PRRSV-1竞争ELISA抗体检测方法，为监测PRRS-1在我国的流行情况及科学防控该病提供了检测手段。

• 单位
  南阳师范学院; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所