摘要

目的确定含抑制结构域的蛋白3(ARRDC3)与微小核糖核酸-30d(miR-30d)在前列腺癌中的表达及ARRDC3的高低表达与前列腺癌进展和预后的相关性,探讨ARRDC3抑制前列腺癌进展的相关机制。方法采用实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测转染后的抑制表达和过表达miR-30d细胞株中ARRDC3 mRNA和蛋白表达情况,分析Taylor数据库中ARRDC3表达水平与前列腺癌患者的临床特征和预后的关系,构建ARRDC3抑制表达和过表达的DU145和LNCaP细胞株,分别采用细胞增殖实验、划痕实验、侵袭实验分析ARRDC3对前列腺癌细胞功能的影响。结果实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法分析结果显示,ARRDC3 mRNA及蛋白表达水平在抑制表达miR-30d的LNCaP细胞株中均上调(P均<0.001),在过表达miR-30d的LNCaP细胞株中均下调(P均<0.001)。Taylor数据库分析显示,生化复发、术后淋巴结转移和高Gleason评分值者的ARRDC3 mRNA表达水平较低(P均<0.05)。Log-rank检验显示,术后无生化复发者ARRDC3 mRNA表达水平高(P<0.05)。细胞增殖实验结果显示,LNCaP与DU145细胞中,与无过表达ARRDC3(NC组)比较,过表达ARRDC3(ARRDC3组)的OD450均较低(P均<0.001);与无抑制ARRDC3表达(KO-NC组)比较,抑制ARRDC3表达(KO-ARRDC3组)的OD450均较高(P均<0.001)。LNCaP与DU145细胞划痕实验及侵袭实验结果均显示,与NC组比较,ARRDC3组的移行细胞数及穿膜细胞数较少;与KO-NC组比较,KO-ARRDC3组的移行细胞数及穿膜细胞数较多。结论 ARRDC3为前列腺癌的抑癌基因,并与前列腺癌淋巴结转移和术后生化复发有关,可作为前列腺癌进展和预后预测的标志物。