三叶半夏种质资源扩繁及保存研究

作者：贾明良; 方荷芳^*; 张本厚; 胡燕花; 周安佩; 李同建; 金洪光; 韩兴杰; 文锋

来源：中国生物工程杂志, 2022, 42(11): 18-26.

DOI：10.13523/j.cb.2209032

• 三叶半夏
• 种质资源
• 组培快繁
• 种质保存

目的：通过对三叶半夏扩繁和保存方法的研究，为三叶半夏种质资源的保育和开发利用提供技术支撑。方法：首先，通过灭菌条件筛选、愈伤诱导及丛生芽诱导等进行扩繁条件探索；其次，通过设置不同基本培养基、蔗糖浓度、不同温度和光照强度等条件探索合适的种质保存条件；最后，探索了休眠块茎唤醒方式和丛生芽再诱导方法，为种质资源再扩繁提供基础。结果：以叶柄为外植体，升汞灭菌12 min后，接种至添加2,4-D的培养基中可诱导疏松愈伤组织。外植体接种至MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,pH 5.8中可进行丛生芽诱导。合适的种质保存基本培养基为MS和N6培养基；合适的蔗糖浓度为30 g/L,过低或过高均不利于种质保存；在丛生块茎诱导时需要提供足够的温度和光照，低温及避光条件不利于种质保存。待丛生芽自然倒苗休眠后可进行长达1～2年的离体保存。对休眠块茎进行唤醒诱导时可采用切割块茎后再接种的方式。萌发出来的叶柄直接进行丛生芽诱导增殖，而块茎则接种至MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,pH 5.8中进行再分化诱导丛生芽。诱导出来的丛生芽进行规模化扩繁或继续进行离体保存。结论：通过对三叶半夏的种质扩繁，筛选合适的条件得到休眠丛生块茎，可对三叶半夏进行长时间的离体保存，而后唤醒和再次诱导的相关研究，为其种质资源保存、利用提供技术基础。

• 单位
  九江学院; 南京工业大学