柚皮素通过AMPK通路介导的自噬对顺铂耐药宫颈癌细胞(HeLa/DDP)顺铂耐药性的影响

作者：贾艳利; 李军芳; 梁高峰

来源：现代药物与临床, 2021, 36(05): 878-884.

• 柚皮素
• 腺苷酸活化蛋白激酶通路
• 自噬
• 宫颈癌
• HeLa/DDP细胞
• 顺铂耐药性

目的探究柚皮素对顺铂耐药宫颈癌细胞(HeLa/DDP)顺铂耐药性的影响,并探究其分子机制。方法体外培养人HeLa/DDP细胞、HeLa细胞,CCK-8法检测不同质量浓度顺铂对HeLa/DDP、He La细胞增殖的影响及不同质量浓度柚皮素对HeLa/DDP细胞增殖的影响。设置对照组、顺铂组(2 mg/L顺铂)、顺铂+柚皮素组(2 mg/L顺铂+60 mg/L柚皮素)和顺铂+柚皮素+AMPK通路抑制剂组(2mg/L顺铂+60mg/L柚皮素+50μmol/LCompoundC);CCK-8法检测各组HeLa/DDP细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组HeLa/DDP细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Westernblotting)法检测各组HeLa/DDP细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况。结果顺铂对HeLa/DDP细胞、HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50)分别在4～8、1～2 mg/L,柚皮素对HeLa/DDP细胞的IC50在30～60mg/L。与对照组相比,顺铂组He La/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与顺铂组相比,顺铂+柚皮素组HeLa/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与柚皮素组相比,AMPK通路抑制剂组He La/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论柚皮素可能通过激活AMPK通路介导的自噬反应,与顺铂联用发挥对HeLa/DDP细胞增殖抑制作用及凋亡促进作用。

• 单位
  河南科技大学第一附属医院