牛磺酸促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖

作者：王燕; 付薇; 刘敬^*

来源：中华围产医学杂志, 2017, 20(07): 530-537.

• 胎儿生长迟缓
• 神经干细胞
• 细胞增殖
• 牛磺酸

目的探讨牛磺酸对胎儿生长受限(fetal growth restriction, FGR)胎鼠神经干细胞(neural stem cell, NSC)增殖的影响。方法采用全程饥饿法, 即仅给予对照组孕鼠正常饮食的40%制作FGR模型。将进行体内实验的SD孕鼠随机分为对照组5只、FGR组7只、牛磺酸组6只(FGR+牛磺酸), 牛磺酸组除接受全程饥饿外, 灌胃补充牛磺酸300 mg/(kg·d), 自孕7 d开始至自然分娩。分娩后称取各组新生鼠出生体重、脑重;采用免疫组化检测各组新生鼠脑组织NSC中脂肪酸结合蛋白-7(fatty acid binding protein-7, FABP-7)的表达。将进行体外实验的孕鼠随机分为对照组和FGR组, 造模方法同前, 于孕14.5 d体外分离胎鼠NSC, 培养5 d后, 采用免疫荧光细胞化学染色法检测FABP-7在原代NSC中的表达;用不同浓度的牛磺酸(5、10、15、20、30、40 mmol/L)处理NSC, 采用CCK8试验检测各组细胞的增殖能力, 计数各组单细胞。采用单因素方差分析、Kruskal-Wallis秩和检验、SNK检验和Tamhane’’s检验进行统计学分析。结果 FGR组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积(10 173±1 728)明显低于对照组(18 012±3 016), 牛磺酸组新生鼠脑组织FABP-7阳性细胞面积(19 518±3 201)明显增加(F=200.8, P<0.05)。对照组和FGR组胎鼠均可分离培养出具备形成神经球能力的NSC, 各组神经球均可表达FABP-7;细胞增殖能力检测显示, 对照组增殖指数为1时, FGR组、FGR+5 mmol/L牛磺酸组、FGR+10 mmol/L牛磺酸组、FGR+15 mmol/L牛磺酸组、FGR+20 mmol/L牛磺酸组、FGR+30 mmol/L牛磺酸组、FGR+40 mmol/L牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数分别为0.80±0.07、0.92±0.11、1.33±0.24、1.20±0.15、1.11±0.14、0.80±0.12和0.82±0.08, 两两比较结果显示10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组胎鼠NSC增殖指数明显高于FGR组(P均<0.01)。对照组、FGR组、不同浓度牛磺酸组所得总细胞数依次为(24.50±0.60)×105、(20.23±1.09)×105、(22.80±0.86)×105、(27.53±1.22)×105、(25.30±1.05)×105、(22.70±0.72)×105、(21.81±1.80)×105和(18.06±0.90)×105, 两两比较结果显示5、10、15、20 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数明显高于FGR组(P<0.01或0.05), 而40 mmol/L浓度的牛磺酸组所得总细胞数低于FGR组(P<0.05)。结论 FGR胎鼠脑内NSC数量明显减少及体外增殖能力明显降低, 产前补充牛磺酸可明显增加FGR胎鼠脑内NSC的数量及促进NSC体外增殖, 且以10 mmol/L浓度促增殖效果较好。

• 单位
  中国人民解放军陆军总医院; 南方医科大学; 泰安市中心医院