摘要

利用荧光定量PCR技术对目标基因进行转录水平分析,选择合适的内参基因作为对照是其前提条件。随着氨氮胁迫菲律宾蛤仔毒性效应的深入研究,需要准确评价氨氮对蛤仔肝胰腺组织基因表达的影响。然而,不同浓度氨氮条件下的菲律宾蛤仔肝胰腺组织的内参基因的筛选尚未报道。本研究以2种不同氨氮浓度暴露菲律宾蛤仔14 d的肝胰腺组织c DNA为q RT-PCR的模板,利用ge Norm、Norm Finder、Best Keeper和Ref Finder软件评估β-肌动蛋白(Actin)、延伸因子1-α(EF-1α)、β-微管蛋白(Tubu)、18S核糖体RNA(18S)、泛素(Ubi)和亲环蛋白A(Cy PA)6个内参基因的表达稳定性。结果表明,肝胰腺组织中备选内参基因的表达稳定性依次为:Actin>18S>Cy PA>Ubi>Tubu>EF-1α,即Actin为表达最稳定的内参基因。本研究为进一步分析氨氮胁迫下菲律宾蛤仔肝胰腺组织的基因表达情况,提供了可靠的内参基因。