妊娠相关蛋白A的纯化及鉴定研究

作者：曾昭伟; 杨静; 王学谦; 李会强; 李向东

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (08): 835-838.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006102

• 妊娠相关蛋白A
• 分子筛
• 反向亲和层析
• 离子交换 pregnancy associated plasma protein A
• molecular sieve
• reverse affinity chromatography
• ion exchange

目的:对比G200凝胶过滤、反向亲和层析、DEAE离子交换等不同的方法纯化孕妇血清中的妊娠相关蛋白A(PAPP-A),为下一步的临床应用研究奠定基础。方法:把正常男性血清过G200凝胶过滤纯化后免疫家兔得到兔抗人抗体,连接溴化氰活化G25凝胶制备反向免疫层析柱。收集足月孕妇血清,离心后依次应用G200凝胶过滤、反向亲和层析及离子交换层析柱纯化。用ELISA检测试剂盒检测各个洗脱峰的PAPP-A活性,SDS-PAGE检测纯化蛋白的纯度。结果:稀释兔抗人血清抗体至浓度为1∶16,双向扩散有明显沉淀线,可以用于制备抗体,蛋白A亲和层析洗脱pH3.0洗脱峰,G200凝胶过滤第一个洗脱峰,反向亲和层析的...

• 单位
  天津医科大学; 天津渤海职业技术学院; 天津市天津医院