摘要
本研究从广西防城港市北仑河口红树林土壤沉积物中筛选到 1 株产普鲁兰酶细菌 GXM-1,利用形态学和 16S rRNA 序列进行分析鉴定,结果表明该菌株为 Bacillus licheniforms;采用同源克隆策略获得了Bacillus licheniforms GXM-1 普鲁兰酶基因(pulM),在 Escherichia coli BL21 中实现了 pulM 的可溶性表达。纯化普鲁兰酶的比活力为 72.6 U/mg,最适反应温度为 40 ℃,最适 p H 为 6.5,Km=(6.442±0.466 8) mg/mL,Vmax=(89.84±2.795) μmol·min-1·mg-1,40 ℃保温 4 h 相对残余酶活力为 40%,在 pH 7.0~8.0 缓冲液中保存 12 h,相对残余酶活力保持在 80%以上,金属离子 Ca2+、Na+、Li+和 Ni+对 PulM 的酶活力有明显的激活作用。研究结果为普鲁兰酶在工业中的应用研究提供了新的思路。
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单位亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室; 广西大学