全反式维甲酸通过激活BMP2的表达抑制中性粒细胞胞外诱捕网的形成

作者：王金丽; 刘志丹; 王晓敏; 仲经亚; 程树群; 潘巍巍; 詹淑玉^*; 郑永霞^*

来源：中国细胞生物学学报, 2022, 44(11): 2057-2070.

• 中性粒细胞胞外诱捕网
• 全反式维甲酸
• 感染性疾病

该研究探讨了全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)释放的调节作用及其可能的机制。体外提取C57BL/6小鼠的中性粒细胞,给予ATRA处理,佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)诱导NETs产生,免疫荧光检测NETs的髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)和脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的共定位, Sytox Green荧光定量细胞外DNA的数量,蛋白质印迹法检测MPO蛋白表达, ELISA检测细胞上清中瓜氨酸化组蛋白(citrullinated histone 3, H3Cit)含量。该研究利用RNA-seq筛选了对ATRA易感的基因,并通过q RT-PCR验证相关差异基因(Arg1、Camkk1、BMP2等)的m RNA表达情况。为了研究ATRA的靶基因BMP2对NETs发生的影响,该研究用BMP2的抑制剂(LDN193189)处理中性粒细胞,再通过Sytox Green荧光实验验证BMP2对NETs形成的作用。结果显示:ATRA处理后的NETs的MPO和DNA共定位减少,MPO蛋白表达水平降低,细胞上清中H3Cit含量显著低于PMA组(P<0.000 1), Sytox Green定量NETs荧光值显著低于PMA组(P<0.01), ATRA以剂量依赖性方式抑制NETs生成; RNA-seq结果显示456个基因的表达发生了变化,其中274个基因上调, 182个基因下调, qRT-PCR结果表明,与PMA组相比, ATRA预处理组中的BMP2、Arg1、Camkk1、Abca1、GSS等基因发生上调,与RNA-seq结果一致; LDN193189处理后, Sytox Green定量NETs荧光值显著高于PMA组(P<0.000 1)。综上, ATRA能够抑制NETs的释放,其机制可能是通过激活BMP2的表达从而抑制NETs形成的。

• 单位
  浙江中医药大学; 浙江工业大学; 嘉兴学院; 基础医学院