摘要
目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)基因对肾癌细胞活力和凋亡的影响及其机制。方法以人胚肾HEK293细胞为对照组细胞,通过Western blot检测人肾癌786-0、A498、ACHN和CaKi-2细胞中IGF2BP1的蛋白表达。将设计并合成的IGF2BP1小干扰RNA(siRNA)经LipofectamineTM 2000转染CaKi-2细胞,Western blot检测转染后的细胞中IGF2BP1、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路关键分子β-catenin及增殖凋亡相关靶基因增殖细胞核抗原(PCNA)、生存素(Survivin)的蛋白表达。结果 786-0 (0.415±0.038)、A498(0. 278±0.030)、ACHN(0. 326±0. 032)和CaKi-2(0. 557±0.053)细胞中IGF2BP1的表达均明显高于在HEK293细胞(0. 062±0. 009)表达(P=0. 003),选择CaKi-2细胞为研究对象。IGF2BP1 siRNA转染后的细胞中IGF2BP1 (0. 073±0. 010)、β-catenin (0. 178±0. 021)、PCNA (0. 147±0. 016)、Survivin(0. 095±0.010)的蛋白表达均明显低于NC组(0. 485±0. 055)、(0. 547±0. 050)、(0. 246±0.028)、(0. 168±0.018),细胞活力(0. 557±0.045)明显低于NC组(0. 804±0. 057,细胞凋亡率(21.48±1.54)%明显高于NC组(2.46±0. 27)%,差异均有统计学意义(P=0.000)。结论 IGF2BP1在肾癌细胞表达升高,抑制其表达后可明显降低细胞活力和诱导凋亡,机制可能是Wnt/β-catenin信号通路的降低。
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单位郑州大学第一附属医院; 郑州儿童医院; 郑州大学