山竹醇通过NF-κB信号通路抑制IL-1β诱导的髓核细胞炎症和细胞外基质降解

作者：张顺利; 顾运涛; 陈荣; 赵海^*

来源：局解手术学杂志, 2021, 30(03): 189-194.

DOI：10.11659/jjssx.10E020002

• NF-κB
• 炎症
• 山竹醇
• 椎间盘退行性变
• 基质代谢

目的探讨山竹醇(Gar)对白介素-1β(IL-1β)诱导的髓核细胞炎症和细胞外基质降解的影响。方法提取大鼠髓核细胞,用含不同浓度山竹醇联合或者不联合IL-1β的新鲜培养基进行培养,根据细胞处理方式分为Control组、IL-1β组、IL-1β+Gar 2.5μM组、IL-1β+Gar 5μM组。采用MTT法检测大鼠髓核细胞活力,采用Western blot、定量RT-PCR和免疫荧光染色检测大鼠髓核细胞的基质代谢、炎症因子水平及相关信号通路蛋白。结果山竹醇在0～10μM剂量下对大鼠髓核细胞无细胞毒性;IL-1β可诱导髓核细胞活力降低(P <0.05),剂量为2.5～10μM的山竹醇能够改善IL-1β刺激下的髓核细胞活力(P <0.05)。IL-1β刺激后髓核细胞中MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5 mRNA表达水平显著提高(P <0.05),而山竹醇能抑制IL-1β刺激后的髓核细胞中MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5 mRNA表达水平(P <0.05)。IL-1β下调了髓核细胞中ColⅡ和Aggrecan mRNA表达水平(P <0.05),而山竹醇则显著改善了IL-1β刺激下髓核细胞中ColⅡ和Aggrecan mRNA表达水平(P <0.05)。IL-1β可显著提高髓核细胞中TNF-α、IL-6、IL-8、COX-2和i NOS mRNA表达水平(P <0.05),而山竹醇可抑制IL-1β诱导的TNF-α、IL-6、IL-8、COX-2和i NOS mRNA表达水平(P <0.05)。Western blot结果显示,IL-1β激活了髓核细胞中的NF-κB信号通路,而山竹醇逆转了IL-1β对NF-κB p65的活化作用(P <0.05),同时逆转了IL-1β引起的IκBα蛋白水平降低(P <0.05)。免疫荧光染色结果显示,IL-1β刺激下髓核细胞核中发生p65核转移,山竹醇显著抑制了p65向核的转移。结论山竹醇可通过抑制NF-κB信号通路,减轻IL-1β诱导的大鼠髓核细胞炎症反应,降低分解代谢水平,具有治疗椎间盘退行性变(IDD)的潜能。

• 单位
  海南医学院第二附属医院