导入nodD-lba串联基因的根瘤菌工程菌株的构建

作者：李珊珊; 李海英; 于冰

来源：生物技术通报, 2013, (08): 119-123.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2013.08.016

• 结瘤基因nodD
• 大豆血红蛋白基因lba
• 费氏中华根瘤菌
• 三亲本杂交 Nodulation gene nodD Glycine maxleghemoglobin genelba Sinorhizobium fredii Triparental hybridization

旨在利用同源序列克隆法,克隆出结瘤相关基因nodD和大豆血红蛋白基因lba。以串联的方式将nodD和lba基因连接到lac启动子的下游,通过DNA重组技术构建出带有发光酶基因luxAB的重组载体pTR-Plac-nodD-lba。通过三亲本杂交方法构建转基因费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii),Western blot试验证明导入基因能够进行表达。将初始菌株和基因工程菌株侵染大豆幼苗后进行固氮酶活的测定。测定结果表明,转基因工程菌株均能够提高固氮酶效率,导入串联基因的工程菌株在提高固氮酶活性上比导入lba和nodD基因的工程菌株高出4%和15.1%。

• 单位
  黑龙江大学