摘要
目的 观察葛根芩连汤对2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene, DNFB)诱导的特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)模型小鼠的干预作用及潜在作用机制。方法 24只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、中药组(葛根芩连汤治疗)和对照组(糠酸莫米松治疗)。DNFB反复刺激皮肤致敏诱导AD小鼠模型。观测各组小鼠皮损评估、皮肤组织病理学、皮肤pH值、经皮水分流失、搔抓行为及血清总免疫球蛋白E (immunoglobulin E,IgE)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)含量。逆转录—聚合酶链式反应(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)法测定丝聚合蛋白、密封蛋白1的mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Weston blot, WB)检测丝聚合蛋白、密封蛋白1的蛋白表达水平。结果 (1)治疗前,与正常组相比,模型组背部皮肤有明显的红斑水肿,并可见结痂、鳞屑、皮肤肥厚增生;搔抓次数明显增多,经皮失水及皮肤pH值显著升高;经治疗,与模型组比较,中药组与对照组皮肤损伤情况改善,搔抓次数、经皮失水、皮肤pH值显著降低(P<0.05);(2)治疗前,模型组小鼠血清总IgE、IL-6、IL-10水平均与正常组有显著差异;经治疗,中药组、对照组总IgE、IL-6水平与模型组相比含量降低(P<0.05);(3)与正常组比较,模型组qRT-PCR显示丝聚合蛋白、密封蛋白1的表达水平降低;WB显示丝聚合蛋白、密封蛋白1蛋白的含量降低;经治疗,中药组、对照组丝聚合蛋白、密封蛋白1的基因表达水平增高;丝聚合蛋白、密封蛋白1蛋白含量增高(P<0.05);(4)皮肤病理学显示与正常组相比,模型组表皮层存在不完全角化,颗粒层和棘层皮肤增厚,表皮、真皮层均有大量炎细胞浸润;经治疗,中药组及对照组小鼠表皮层角化不全程度较轻,颗粒层、棘层皮肤轻微增厚,炎细胞浸润减轻。结论 葛根芩连汤可以减轻AD模型小鼠皮损程度,减少搔抓次数,有效降低经皮失水、皮肤pH值,下调小鼠血清IgE、IL-6水平,上调丝聚合蛋白、密封蛋白1的表达,抑制炎症反应和改善皮肤屏障,为中医“皮应大肠”理论和皮肤病从肠论治提供了实验依据。
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