基于N-聚糖和完整糖肽的单克隆抗体药物糖基化修饰表征

作者：李梦林; 朱文文; 张金兰^*

来源：药学学报, 2021, 56(09): 2360-2366.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2021-0639

• 液质联用
• 糖基化修饰
• 阿达木单抗
• 贝伐珠单抗
• 曲妥珠单抗
• 游离N-聚糖
• 完整糖肽

近年来生物制药产业快速增长,其中单克隆抗体药物的市场规模增速显著,对其进行精确的结构表征和质量控制的需求日益突出。作为抗体药非常重要的翻译后修饰,糖基化对单抗药的疗效、稳定性、免疫原性都具有重要的影响。对糖基化修饰进行表征的主要方式之一是液相色谱串联质谱技术,但该方法目前主要集中在中高丰度的聚糖表征,对低丰度的糖基化修饰研究较少。本研究建立了基于RapiFluor-MS试剂标记的单克隆抗体药物的N-聚糖定性和定量分析技术,该方法样品处理时间短,灵敏度高,不仅能够表征3种单抗药阿达木单抗、贝伐珠单抗和曲妥珠单抗的主要糖型,而且对低丰度糖基化修饰能够准确的表征并定量分析。基于该方法,作者研究了上述3种单抗药主要糖型,并对不同批次的样品中N-聚糖的相对丰度进行了对比。同时在完整糖肽水平对N-聚糖的连接位点和糖型进行解析,进一步丰富了单抗药的N-聚糖结构信息。基于RapiFluor-MS试剂标记的单克隆抗体药物的N-聚糖定性和定量分析技术能够实现对单抗药糖基化修饰的深度表征和控制。

• 单位
  药物研究所; 中国医学科学院北京协和医学院; 天然药物活性物质与功能国家重点实验室