基于一水草酸钙诱导HK-2细胞损伤模型筛选广金钱草药效成分及其作用机制

作者：李**; 王术玲; 曹骋; 陈丰连^*

来源：药学学报, 2020, 55(10): 2375-2380.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2020-0259

• 广金钱草
• 草酸钙结石
• 活性成分
• 黄酮
• 炎症因子

研究广金钱草保护一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate, COM)诱导人近端肾小管上皮细胞(human proximaltubular epithelial cell, HK-2)损伤模型的药效成分,并进一步探讨其作用机制。首先建立COM诱导HK-2细胞损伤模型,通过MTT法对广金钱草中所含8种黄酮成分(夏佛塔苷、异夏佛塔苷、维采宁-2、异牡荆苷、异荭草苷、芹菜素、木犀草素和染料木素)进行药效筛选,检测不同处理组细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生量, Western blot检测HK-2细胞中NLRP3炎症小体相关蛋白(NLRP3、caspase-1、HMGB1)的表达水平,进一步探讨药效成分的作用机制。研究结果表明,与模型组相比,广金钱草总黄酮(total flavonoids of Desmodium styracifolium, TFDS)及4个黄酮单体(异荭草苷、芹菜素、染料木素和木犀草素)干预后的细胞活力显著上升,均可减少细胞上清液中LDH释放量,提高细胞内SOD活性,减少ROS产生量; COM造模后细胞内NLRP3炎症小体相关蛋白(NLRP3、caspase-1、HMGB1)表达均升高,给药组细胞中表达均有不同程度的回调。综上, TFDS及芹菜素、异荭草苷、木犀草素、染料木素可保护COM诱导HK-2损伤细胞,其作用机制包括提高细胞活力、保护细胞膜完整性和提高细胞抗氧化应激能力,并且可调控NLRP3炎症小体相关蛋白的表达。

• 单位
  广州中医药大学