表没食子儿茶素没食子酸酯对人牙周膜细胞增殖及成骨分化的影响

作者：刘洁; 逯宜; 王珍珍; 杜文治; 裴丹丹

来源：中华口腔医学杂志, 2016, 51(12): 758-764.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2016.12.011

• 没食子酸
• 儿茶素
• 牙周膜
• 细胞增殖
• 成骨分化

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)增殖及成骨分化的影响,探讨其对促进牙周骨组织再生的作用。方法收集新鲜拔除的前磨牙,分离其牙周韧带并进行hPDLC原代培养。取第4代hPDLC,分别给予0、2、4、6、8、10μmol/L EGCG处理,处理24、48、72 h时采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(cell counting kit,CCK)检测细胞增殖情况,培养第7、14天时检测碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性,培养第21天时采用茜素红对矿化结节进行染色及定量分析,处理7 d时采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,Runx2)、ALP和Ⅰ型胶原的表达情况。结果 4μmol/L EGCG作用于hPDLC 24 h时促进细胞增殖,8、10μmol/L EGCG作用于hPDLC 24、72 h时抑制细胞增殖。2、4、6、8、10μmol/L EGCG成骨诱导21 d时均可见红染的矿化物,hPDLC吸光度值分别为0.119±0.001、0.167±0.003、0.173±0.003、0.110±0.001、0.083±0.003,除10μmol/L EGCG组与无EGCG组(0.077±0.001)间差异无统计学意义外,其余组均显著高于无EGCG组(P值均<0.05)。各浓度EGCG均可促进细胞Ⅰ型胶原、ALP表达,其中4、6μmol/L效果最显著;4、6μmol/L EGCG可促进细胞Runx2表达,且4μmol/L组促进效果优于6μmol/L组。结论 4μmol/L EGCG在早期对细胞增殖有促进作用,46μmol/L EGCG能显著增强hPDLC的成骨向分化。

• 单位
  西安交通大学