核糖体展示技术筛选抗呋喃唑酮单链抗体

作者：陈荫楠; 罗彩林; 郑晨娜; 石贤爱^*; 刘震

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(01): 59-64.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003807

• 呋喃唑酮
• 单链抗体
• 核糖体展示技术

目的 运用核糖体展示技术筛选高特异性抗呋喃唑酮(furazolidone,FZD)单链抗体，并进行初步分析。方法 提取小鼠杂交瘤细胞总RNA，利用反转录PCR及重叠延伸(splicing by overlap extension,SOE)-PCR技术合成VH-linker-VL单链抗体文库。采用TNT T7 Quick for PCR DNA试剂盒对单链抗体文库进行体外翻译及筛选，经过三轮筛选富集目的基因，对目的基因进行原核表达及纯化后，初步分析其特异性及亲和力。结果 获取1株特异性较高的单链抗体FZD-ScFv1,IC50值为13.01 ng/mL，与呋喃它酮、呋喃妥因、氨基脲、呋喃西林及其衍生物之间的交叉反应率均小于1%。结论 利用核糖体展示技术成功获得亲和力较好的单链抗体，该抗体可用于建立ELISA法，为FZD残留量的快速检测提供了新的思路。

• 单位
  泉州医学高等专科学校; 福州大学