摘要
目的通过构建的non-stop绿色荧光蛋白(GFP)质粒,了解non-stop变异对GFP的影响。方法使用T4连接酶将合成的含有点突变的DNA短片段插入质粒pEGFP-C1生成non-stop GFP。通过荧光显微镜及Western blot观察non-stop GFP的变化。结果 non-stop GFP蛋白量少于正常GFP蛋白量,只有正常GFP条带蛋白量的12.6%。同时,non-stop GFP蛋白分子量约大于正常GFP 8 000 Mr。结论 non-stop变异使GFP持续翻译至poly(A),同时加速了蛋白的衰减。
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单位中山大学公共卫生学院