胃癌干细胞来源的伴侣分子-抗原肽瘤苗的制备及其免疫功能

作者：姜贻乾; 郭庆敏; 徐小平; 梁军才; 何一扬; 安素红; 苏芳; 李朝阳; 黄常新

来源：中华肿瘤杂志, 2017, 39(02): 109-114.

• 胃肿瘤
• 肿瘤干细胞
• 伴侣分子-抗原肽
• 亲和层析
• 瘤苗

目的探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子-抗原肽的方法及其免疫功能。方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞,经盐析粗提蛋白及透析后,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析伴侣分子-抗原肽表达量,采用溴化氰活化琼脂糖凝胶4B亲和层析分离、纯化伴侣分子-抗原肽,采用反向高压液相色谱、SDS-PAGE和Western blot法进行蛋白纯度分析,采用淋巴细胞增殖实验和细胞毒活性实验检测伴侣分子-抗原肽的免疫活性。结果成功制备并鉴定胃癌干细胞的伴侣分子-抗原肽,主要组分为HSP60-抗原肽、HSP70-抗原肽、HSP90-抗原肽和HSP110-抗原肽。0.75μg HSP70-抗原肽、1.00μg HSP70-抗原肽和1.00μg HSP90-抗原肽对淋巴细胞有明显的增殖作用,其A490值分别为0.26±0.03、0.45±0.05和0.32±0.04,而相应剂量的HSP60-抗原肽和HSP110-抗原肽不能激活淋巴细胞。1.00μgHSP70-抗原肽组和1.00μg HSP70组的细胞杀伤率分别为(45.0±2.0)%和(16.0±2.0)%,差异有统计学意义(P=0.012)。1.00μg HSP90-抗原肽组和1.00μg HSP90组的细胞杀伤率分别为(36.0±5.0)%和(13.0±4.0)%,差异有统计学意义(P=0.048)。结论胃癌细胞中伴侣分子-抗原肽含量极低,而胃癌干细胞中伴侣分子-抗原肽含量明显增多,经提纯后可制备纯度较高的伴侣分子-抗原肽。提取的伴侣分子-抗原肽具有较强的免疫原性,可在体外制作瘤苗,可能在胃癌靶向治疗上有较好的应用价值。

• 单位
  杭州市萧山区第一人民医院; 杭州师范大学