摘要
该实验以水蛭药材目前在市场上流通最广泛的品种——蚂蟥Whitmania pigra为研究对象,探索重金属铅污染对蚂蟥药材的抗凝血活性的影响,并尝试挖掘其潜在作用机制。该实验利用硝酸铅对蚂蟥养殖土壤进行污染,养殖50 d后得到铅污染组(LC组),同时进行空白对照组(CG组)的养殖。获得蚂蟥样品后,对其进行蛋白提取,通过非标记定量(label-free)蛋白质组学技术分析LC组与CG组的差异表达蛋白。该实验共筛选得到差异表达蛋白152个,其中93个蛋白在LC组中表达上调,59个蛋白表达下调。生物信息学分析发现,差异表达蛋白显著富集在囊泡介导转运和转运正调节等生物过程;在细胞组分方面,显著富集在内吞小泡和顶端质膜等条目;在分子功能方面,显著富集在碳水化合物结合等条目。通过KEGG富集分析,得到差异表达蛋白参与的通路76条,集中体现在代谢途径、次生代谢产物的生物合成和上皮细胞的细菌侵袭等途径。该研究得到2个具有Antistasin结构域的抗凝蛋白,可为进一步探究重金属铅污染对蚂蟥抗凝血活性影响的调控机制和信号转导提供参考。
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