猪肺炎支原体P97 C末端蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位分析

作者：张美晶; 王亮; 李媛; 董慧; 姜海芳; 陈超; 曹培丽; 郭丹; 辛九庆

来源：中国兽医科学, 2010, (02): 150-157.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.02.012

• 猪肺炎支原体
• 单克隆抗体
• 抗原表位
• 肽扫描
• 生长抑制试验 Mycoplasma hyopneumoniae
• monoclonal antibody
• epitope
• pepscan
• growth inhibition assay

以大肠杆菌表达的pET-30a-P97C重组蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备针对猪肺炎支原体P97C末端蛋白的单克隆抗体,并将其与截短表达的P97C末端蛋白进行免疫印迹分析,初步鉴定了P97C末端蛋白的抗原表位。进一步采用肽探针扫描技术确定最小抗原决定区域,并通过生长抑制试验及抗黏附特性试验对抗原表位进行了分析。结果显示,获得2株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株A3C9和B4D5,并成功鉴定出P97C末端蛋白的2个独立线性表位F905PMAFSY911和G991TPNQGKKAE1000。2株单抗对猪肺炎支原体的生长均有一定的抑制作用,但对其黏附特性没有显著抑制作用。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室