治疗性双质粒HBV DNA疫苗的纯化与检定

作者：饶桂荣; 黄明; 杨富强; 莫国玉; 刘惠萍; 陈光明

来源：中国生物制品学杂志, 2007, (12): 913-916.

DOI：10.13200/j.cjb.2007.12.46.raogr.011

• 治疗性HBV DNA疫苗
• 质粒
• 纯化
• 质量控制 Therapeutic HBV DNA vaccine
• Plasmid
• Purification
• Quality control

目的研究双质粒HBVDNA疫苗(pS2.S和pFP)的纯化工艺,并建立质控标准。方法首先对两工程菌(DH5α/pS2.S和DH5α/pFP)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;然后通过三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)进行质粒纯化,并检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定。结果质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量的RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,最后经阴离子柱层析有效去除内毒素,并浓缩了质粒,质粒得率为0.9～1.1mg/g菌,质粒总回收率达78%。三批终产品全面质量检定均符合规定...

• 单位
  解放军第458医院