肺炎球菌溶血素基因的克隆

作者：陈兵; 戴文佳; 王正敏; 李忠明

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科, 2006, (04): 237-239.

DOI：10.16066/j.1672-7002.2006.04.008

• 疫苗
• 中耳炎
• 链球菌,肺炎
• 溶血素类

目的应用基因工程技术克隆肺炎球菌溶血素(pneumolysin,Pn)基因,为研制中耳炎蛋白多糖结合疫苗奠定基础。方法根据Walker等肺炎球菌溶血素基因序列(GenBankaccessionno.X52474),设计一对各带有一个限制性酶切位点的引物,运用PCR从肺炎球菌的染色体DNA扩增出肺炎球菌溶血素基因。对该PCR产物进行酶切、回收,并将其克隆入表达载体pET-28a,然后转化至大肠杆菌JM109(DE3)宿主细胞中。结果通过常规基因克隆方法和PCR技术,成功构建重组体,酶切鉴定和基因测序证实构建正确。结论利用基因工程技术成功克隆了肺炎球菌溶血素基因。

• 单位
  复旦大学附属眼耳鼻喉科医院