后半规管途径导入不同血清型腺相关病毒转染小鼠耳蜗内毛细胞的效果比较

作者：刘珊; 郭瑞; 宋新雨; 于倩茹; 陈钟壡; 梁文琦; 滕琪; 龚树生; 柳柯^*

来源：首都医科大学学报, 2022, 43(04): 527-534.

DOI：10.3969/j.issn.1006-7795.2022.04.003

• 腺相关病毒
• 病毒转染
• 耳蜗
• 内毛细胞
• 后半规管

目的 探讨不同血清型的腺相关病毒经后半规管途径导入成年小鼠转染内耳细胞的效率及安全性。方法 将20只6～8周C57BL/6J小鼠采用数字表法随机分为5组：腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)4组，AAV8病毒注射组、AAV9病毒注射组、AAVie病毒注射组和Anc80L65病毒注射组，均采取后半规管路径进行注射，每只注射病毒溶液2μL;正常对照组，每只注射0.9%(质量分数)氯化钠注射液2μL,均以左耳为手术耳。各组于术前1 d及术后2周行听觉脑干反应(auditory brainstem response, ABR)检查，随后取材进行免疫荧光染色观察病毒在基底膜的分布情况。结果 AAV8组：术后2周观察见耳蜗顶中转34.6%±1.8%内毛细胞被转染，中底转39.0%±5.9%内毛细胞表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP);AAV9组：术后2周见耳蜗顶中转92.5%±1.1%内毛细胞被转染，中底转94.6%±1.0%内毛细胞表达GFP; AAVie组：术后2周见耳蜗顶中转96.7%±1.5%内毛细胞被转染，中底转97.7%±0.8%内毛细胞表达GFP; Anc80L65组：术后2周见耳蜗顶中转62.5%±3.3%内毛细胞转染，中底转63.1%±6.1%内毛细胞表达GFP;正常对照组未见GFP表达。结论 经半规管途径注射AAVie、AAV9病毒溶液可以高效转染到耳蜗内毛细胞，此结果对耳聋疾病的内耳基因治疗具有一定的参考意义。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院; 首都医科大学