VPS28通过泛素化信号通路调控奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白的合成

作者：任宇; 燕文荃; 丁玥竹; 扈孟雪; 周杰珑; 吴培福; 陈粉粉; 刘莉莉^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(08): 2558-2567.

• VPS28
• 乳蛋白
• 泛素化
• RNAi
• iTRAQ

旨在分析VPS28基因调控乳蛋白合成的分子机制，为奶牛泌乳性状的分子育种奠定理论基础。本研究首先利用RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术敲降奶牛原代乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, BMECs)中VPS28基因的表达水平，检测与乳蛋白合成、泛素化-溶酶体和泛素化-蛋白酶体通路相关的11个基因、泛素蛋白的表达水平及蛋白酶体活性；然后抑制BMECs中蛋白酶体和溶酶体的活性，检测酪蛋白相关基因、核糖体蛋白的表达水平；最后利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification, iTRAQ)比较蛋白质组学分析敲降前后BMECs的差异表达蛋白。结果表明，敲降VPS28基因后，CSN1S1、CSN2、CSN3、RPS8、UBC、PSMC3、PSMC5基因均显著上调，PSMD12显著下调；抑制蛋白酶体后，CSN1S1、CSN2、CSN3显著上调，RPL13显著下调；抑制溶酶体活性后酪蛋白相关基因表达不显著；iTRAQ结果共筛选出129个差异表达蛋白，下调蛋白主要富集在核糖体、溶酶体、剪切体等相关通路，上调蛋白主要富集在内质网的蛋白质加工、加压素调控的水重吸收过程、RNA转运等通路中。研究表明，VPS28基因可通过泛素化信号通路影响BMECs中乳蛋白的合成。

• 单位
  生命科学学院; 西南林业大学