乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖条件的优化

作者：王笑天; 李爽; 席莉; 丁瑞远; 刘玮彤; 姚为民; 柴文; 张雪梅^*; 吴业红^*

来源：中国生物制品学杂志, 2020, 33(05): 544-548.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003057

• MDCK细胞
• 悬浮培养
• 流感病毒
• HA血凝滴度

目的优化乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件。方法以乙型流感病毒感染无血清悬浮培养的MDCK细胞,对培养条件中的MOI(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7)、胰酶终浓度(2. 5、5、7. 5、10、15、20μg/mL)、细胞接毒密度(50×104、100×104、300×104、500×104、700×104个/mL)及病毒收获时间(24、48、72、96、120 h)进行优化。同时对流感病毒在贴壁培养及无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖情况进行比较。结果乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上最适增殖条件为:MOI为10-2、胰酶终浓度为10μg/m L、细胞接毒密度为300×104个/mL、病毒收获时间为72 h。流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上增殖的HA血凝滴度及病毒滴度(CCID50)均明显高于贴壁培养的MDCK细胞(P <0. 05)。结论优化了乙型流感病毒在无血清悬浮培养MDCK细胞上的增殖条件,为后续采用生物反应器大规模生产流感疫苗奠定了基础。

• 单位
  长春生物制品研究所