摘要
目的研究软骨分化形成蛋白-2(CDMP-2)对小鼠骨髓基质干细胞软骨分化的作用。方法体外培养小鼠骨髓基质干细胞(MSCs),贴壁细胞传代,取第3代细胞,以不同浓度(0、10、20、50、100ng/ml)CDMP-2因子干预培养14d后,倒置相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学法检测不同浓度CDMP-2对Ⅱ型胶原表达的影响,阿尔辛蓝(Alcian)染色蛋白多糖。结果RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学显示经CDMP-2因子干预后,MSCs有Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达,呈剂量依赖性;Alcian染色结果显示CDMP-2诱导细胞分泌蛋白多糖基质,高浓度组可见细胞小结区域呈明显的异染性。结论CDMP-2能够在体外定向诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨方向分化,50~100ng/ml为最佳剂量,为进一步探讨其在软骨发育机制中的作用提供了实验基础。
-
单位华中科技大学同济医学院附属协和医院