高羊茅Fa6-SFT基因克隆、亚细胞定位及表达分析

作者：陈锡; 赵德刚; 陈莹; 刘晓霞; 袁旸旸; 王小利^*

来源：植物生理学报, 2020, 56(04): 759-770.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2019.0552

• Fa6-SFT
• 基因克隆
• 生物信息学分析
• 亚细胞定位
• 表达分析

蔗糖:果聚糖-6-果糖基转移酶(sucrose:fructan 6-fructosyl-transferase, 6-SFT)是禾本科植物中果聚糖合成的关键酶,在植物抵御干旱、低温、盐胁及氮胁等非生物逆境胁迫中起着十分重要的作用。为了探讨‘黔草1号’高羊茅(Festuca arundinacea)中6-SFT基因的分子机制,利用RT-PCR结合RACE技术(rapid amplification of cDNA ends)从高羊茅中克隆了6-SFT基因。序列分析显示, cDNA全长为2 375 bp,包含一个完整的开放阅读框1 860 bp,编码蛋白含有620个氨基酸,命名为Fa6-SFT。理化性质分析显示,其蛋白分子质量为68.20 kDa,理论等电点pI为5.61,属于酸性蛋白。保守结构域分析发现,由该基因推导的氨基酸序列具有糖基水解酶32 (glycosyl hydrolase family 32, GH32)家族保守结构域。蛋白多重序列比对及进化树分析发现,高羊茅Fa6-SFT与猫尾草、黑麦草和毒麦亲缘关系最近。亚细胞定位显示Fa6-SFT主要定位于细胞核和细胞膜。实时荧光定量PCR检测分析表明,干旱、高温、盐胁迫和氮胁迫等非生物胁迫均能调控Fa6-SFT基因的表达,推测高羊茅Fa6-SFT可能与非生物逆境胁迫密切相关。

• 单位
  贵州省农业科学院; 贵州大学