猪链球菌2型毒力因子gapdh基因的克隆·表达及与Hela细胞互作蛋白的筛选

作者：袁芳艳; 谭臣; 雷丽; 贝为成; 刘泽文; 郭锐; 段正赢; 杨克礼; 周丹娜; 田永祥

来源：安徽农业科学, 2014, (36): 12821-12824.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.36.012

• 2型猪链球菌
• GAPDH
• 原核表达
• 多抗制备
• 受体 Streptococcus suis serotype 2
• Prokaryotic expression
• Receptor

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白。[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒p ET28a-gapdh。[结果]在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约41 k Da的融合蛋白GAPDH。Western blot试验说明GAPDH具有良好的免疫学活性。利用新西兰大白兔制备抗GAPDH蛋白的多克隆抗体。运用配体重叠技术,在He La细胞中初步找到了一个与GAPDH蛋白作用的潜在受体蛋白。[结论]为进一步研究猪链球菌2型的分子致病机理奠定基础。

• 单位
  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所; 农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学