原花青素对苯并[a]芘神经毒性的保护作用

作者：冯婧宇; 魏智超; 魏建宏^*

来源：环境与职业医学, 2023, 40(04): 441-447.

• 苯并[a]芘
• 原花青素
• 氧化应激
• 海马神经元细胞
• 核转录因子E2相关因子2
• 血红素加氧酶-1

[背景]苯并[a]芘(BaP)具有神经毒性，可经氧化应激致神经元损伤。原花青素(PC)具有抗氧化活性，其机制可能核转录因子E2相关因子2(Nrf2)-血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路有关。[目的]探讨PC对BaP诱导的氧化应激致海马神经元损伤的保护作用。[方法]取新生24 h内SD大鼠，分离培养海马神经元，采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活性。根据预实验结果设立对照组、10、20、40μmol·L-1的BaP组，免疫荧光法观察各组海马神经元突起的长度及分支数，活性氧(ROS)荧光探针法测定细胞的ROS水平，实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blotting分别检测各组海马神经元Nrf2、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、HO-1、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bax)的mRNA和蛋白表达。根据预实验结果设立对照组、BaP单独处理组(BaP 2 0μmol·L-1)、PC干预组(BaP 20μmol·L-1+PC 2.5μg·mL-1)，后续实验方法同上。[结果]与对照组相比，10、20、40μmol·L-1 BaP组海马神经元突起长度逐渐变短[(177.60±3.49)、(142.40±6.52)、(100.50±19.40)μm](P<0.05)，分支数逐渐减少(8.00±1.00、6.33±1.53、4.33±0.58)(P<0.05);ROS的生成逐渐增加(2.38±0.33、8.08±0.26、9.86±0.19)(P<0.05);qRTPCR检测结果显示，Nrf2(0.35±0.03、 0.25±0.01、 0.13±0.03)、 Keap1(0.70±0.01、 0.47±0.03、0.15±0.02)、HO-1(0.77±0.02、0.60±0.02、0.32±0.01)、Bcl-2(0.65±0.03、0.47±0.02、0.18±0.02)的mRNA表达逐渐降低，Bax(1.24±0.01、 2.25±0.15、 4.98±0.30)的mRNA表达逐渐升高(P<0.05);Western blotting检测结果显示，Nrf2、Keap1、HO-1、Bcl-2、Bax的蛋白表达变化趋势与mRNA一致。与BaP单独处理组相比，PC干预组突起长度变长，(149.90±3.01)μm vs(202.00±4.45)μm(P<0.05)，分支数增加，(4.67±0.58)vs(8.33±0.58)(P<0.05); ROS减少，(10.81±0.63)vs(7.31±0.70)(P<0.05); Nrf2、 Keap1、 HO-1、 Bcl-2的mRNA表达水平增加(P<0.05),Bax的m RNA表达水平减少(P<0.05);Nrf2、Keap1、HO-1、Bcl-2蛋白表达增强(P<0.05),Bax蛋白表达减少(P<0.05)。[结论] PC可能通过激活Nrf2-HO-1信号通路，抑制BaP所致的神经元细胞氧化应激损伤，减少细胞毒性，从而发挥神经保护作用。

• 单位
  山西医科大学汾阳学院; 公共卫生学院; 山西医科大学