不同预处理对酒精浸制标本DNA提取效果比较

作者：刘鹏冀; 王文强; 苑彩霞^*

来源：延安大学学报(自然科学版), 2022, 41(02): 83-88.

DOI：10.13876/J.cnki.ydnse.2022.02.083

• 预处理
• DNA提取
• 昆虫
• 朽木甲亚科

为解决昆虫样本在保存和运输过程中因DNA降解而导致DNA提取效果差的问题。研究采用0.9%NaCl溶液、Tris-EDTA盐水缓冲液(STE)、磷酸缓冲盐溶液(PBS)、无菌水对朽木甲酒精浸制标本进行预处理，提取基因组DNA后，比较分析基因组DNA的质量、浓度及PCR的扩增效果。结果表明：0.9%NaCl溶液、STE缓冲液、PBS缓冲液这3种预处理方式均可在一定程度上提升朽木甲酒精浸制标本DNA的得率和PCR扩增的质量，其中使用PBS缓冲液进行预处理对朽木甲酒精浸制标本DNA提取的综合提升效果最佳；使用无菌水进行预处理对样本DNA提取没有任何提升作用，反而会使PCR扩增的效果更差；相较于线粒体基因片段的PCR扩增，除无菌水外的其他3种预处理方式对核基因的PCR扩增提升效果均较佳；此外，不同预处理均对提取到的DNA的OD260/280值没有显著的影响。本研究结果为朽木甲酒精浸制标本的基因组DNA提取提供了更好的预处理方式，大大提高了其DNA提取的得率和扩增质量，减少了在DNA提取过程中标本数量的消耗和浪费。为后续的分子研究工作奠定了基础，同时也为其他昆虫酒精浸制标本的DNA提取方案提供了优化思路。

• 单位
  延安大学