上调miR-125a-5p抑制急性髓系白血病细胞系的增殖和侵袭

作者：高秋英; 荀利如; 李岚; 侯丽敏; 周伟; 王晖^*

来源：基础医学与临床, 2021, 41(11): 1594-1605.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2021.11.015

• 急性髓系白血病
• miR-125a-5p
• 增殖
• 侵袭
• 凋亡
• NF-κB信号通路

目的研究miR-125a-5p对急性髓系白血病(AML)细胞系增殖和侵袭的调控作用。方法 RT-qPCR检测AML患者骨髓标本、AML细胞系(U937和HL60)及外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125a-5p和TRIM71的表达。将U937和HL60细胞分为对照组(control)、miR-125a-5p模拟物组(miR-125a-5p mimic)、miRNA阴性对照组(miR-NC)、TRIM71过表达质粒组(pcDNA3.1-TRIM71)和对照质粒组(pcDNA3.1-NC)。采用Lipofectamine 2000将miR-125a-5p mimic、pcDNA3.1-TRIM71及阴性对照转染U937和HL60细胞。MTT法检测细胞增殖,基质胶侵袭试验测定细胞侵袭,流式细胞测量术检测细胞凋亡。RT-qPCR或Western blot检测TRIM71、Bax、Bcl-2、NF-κB p65的表达。通过荧光素酶报告基因验证miR-125a-5p和TRIM71的靶向调控关系。结果与对照或PBMC相比,miR-125a-5p在AML患者骨髓样本和AML细胞系中的表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-125a-5p mimic组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显降低,而细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组相比,pcDNA3.1-TRIM71组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测显示,miR-125a-5p mimic有效抑制了pGL3-TRIM71-WT的荧光素酶活性。与miR-125a-5p mimic组相比,(miR-125a-5p mimic+pcDNA3.1-TRIM71)组的细胞活力和细胞侵袭率显著增加,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。与miR-125a-5p mimic组相比,(miR-125a-5p mimic+pcDNA3.1-TRIM71)组的nucleus NF-κB p65蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论上调miR-125a-5p通过靶向抑制TRIM71来降低AML细胞系的增殖和侵袭并诱导凋亡;miR-125a-5p可通过抑制NF-κB信号通路的活化来抑制AML细胞增殖。

• 单位
  人民医院血液科; 陕西省人民医院