摘要

应用高浓度非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids, NEFA)处理MAC-T细胞并添加α生育酚,采用Western blot技术检测乳脂乳蛋白合成相关关键蛋白的表达,并利用生化试剂盒检测细胞中TG和MDA含量,通过酶活试剂盒检测细胞SOD、CAT和GSH-Px酶活性。结果显示,在1.2 mmol/L NEFA作用下,MAC-T细胞β-casein蛋白表达以及乳蛋白合成相关蛋白mTor和S6K1磷酸化水平降低,细胞TG含量和合成相关蛋白SREBP1蛋白表达升高,同时氧化产物MDA含量升高,抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px活性降低,表明高浓度NEFA可以诱导奶牛乳腺上皮细胞发生氧化应激,并抑制乳蛋白合成,促进乳脂合成。用1.2 mmol/L NEFA处理细胞并添加10μmol/L α生育酚,发现α生育酚可以缓解NEFA导致的β-casein蛋白水平下降,恢复mTor和S6K1磷酸化水平,降低细胞TG含量和SREBP1蛋白表达。同时,α生育酚还可以降低细胞MDA含量,升高SOD、CAT和GSH-Px的活性。结果表明,维生素E类似物可以降低高NEFA引起的乳腺上皮细胞氧化应激水平,缓解NEFA对乳脂乳蛋白合成的影响。