产木聚糖酶嗜热真菌鉴定、酶基因克隆及生物信息学分析

作者:周彩霞; 赵治巧; 唐宇佳; 金伟琼; 肖义蓉; 王寅生; 李蕴哲; 唐自钟*; 陈惠
来源:基因组学与应用生物学, 2021, 40(01): 197-203.
DOI:10.13417/j.gab.040.000197

摘要

木聚糖酶是一类木聚糖降解酶系,在食品、饲料领域应用广泛。本实验对实验室前期保存的一株产木聚糖酶真菌TL01进行形态学、18S rDNA及产酶鉴定,其结果表明TL01为梳棉状嗜热真菌(Thermomyces lanuginosus),以木糖为底物,测得粗酶液酶活为0.250±0.03 U/m L。对其两种主要的木聚糖酶基因(xyn11A和xyl43)进行克隆并对其编码蛋白(Xyn11A和Xyl43)进行了生物信息学分析。Xyn11A预测蛋白分子量24.36 kD,等电点为4.77,含有19个氨基酸的信号肽序列,属于亲水性蛋白,无跨膜结构域,其二级结构主要是无规则卷曲(44.89%);Xyl43蛋白分子量38.24 kD,等电点为5.23,编码的胞内蛋白属于亲水性蛋白,无跨膜结构域,无规则卷曲(59.76%)是其主要的二级结构。本研究通过对Th. lanuginosus TL01的xyn11A和xyl43基因克隆及其编码蛋白的生物信息学分析,为后续进一步构建高效表达工程菌株奠定了基础。

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