钴原卟啉上调HO-1表达对脂多糖诱导的小鼠肺组织炎症损伤的影响

作者：李鑫; 向国安; 苏程程; 马永强; 周欣; 彭守春; 魏路清; 姬文婕

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2017, 26(05): 381-386.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2017.05.003

• 急性肺损伤
• 血红素加氧酶-1
• 脂多糖
• 钴原卟啉

【目的】探讨注射钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,Co PP)在内毒素诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠模型中上调血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对小鼠肺组织炎症损伤的影响。【方法】120只1618 g雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水(normal saline,NS)组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、LPS+NS组以及LPS+钴原卟啉(Co PP)组。采取经腹腔注射LPS(5 mg/kg)法建立实验性ALI模型。LPS+Co PP组及LPS+NS组均在注射LPS造模之前4 h,分别预先经腹腔注射给予Co PP(5 mg/kg)或等体积的无菌NS。在1、3、7天后分别取材,采用HE染色观察肺泡、肺间质炎症浸润情况并进行炎症评分(inflammatory score,IS);采用BCA蛋白定量法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白含量,ELISA检测BALF及血清中白介素-8(interleukin 8,IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)含量;使用乳酸盐脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒用微板法检测BALF中LDH活性;右肺分别提取总RNA或总蛋白,采用RTPCR联合2-△△Ct计算方法检测评估HO-1 m RNA相对表达量,Western blotting检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)蛋白表达水平。【结果】在第1天,LPS+Co PP组HO-1 m RNA水平均明显高于LPS+NS组(P<0.01),在第3天持续升高(P<0.01),第7天各组无差异。与NS组相比,LPS组及LPS+NS组小鼠第1天的IS、BALF总蛋白含量和LDH活性及BALF和血清中IL-8、MCP-1水平均明显增高;在第3天持续升高,且肺组织MPO蛋白表达量亦增高(P<0.01)。与LPS+NS组相比,LPS+Co PP组小鼠第1天的IS、BALF总蛋白含量、LDH活性及BALF和血清中IL-8水平均降低,在第3天除以上4个指标持续降低外,BALF及血清中MCP-1、肺组织MPO蛋白表达水平也均降低(P<0.01)。【结论】Co PP上调HO-1 m RNA的表达,可能是通过下调炎性趋化因子IL-8和MCP-1的分泌,缓解了肺组织炎症反应,有助于LPS诱导的ALI的修复。

• 单位
  中国人民武装警察部队总医院; 武警后勤学院