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摘要
报道了一种筛选高表达融合蛋白HSA-IL-11的毕赤酵母转化子的免疫双膜筛选法。将生长在醋酸纤维素滤膜上的转化子进行原位诱导,再用硝酸纤维素滤膜对表达的蛋白进行原位捕捉,并经封闭过夜后使用抗HSA抗体进行免疫杂交,再用标记二抗进行显色。根据显色强弱将转化子分为强阳性、中等和阴性三类,再用抗IL-11抗体进行复筛验证。结果显示,抗HSA抗体所筛得的200株强阳性转化子中190株在抗IL-11抗体杂交验证中呈现强阳性反应,而无一株呈现阴性反应。这表明,利用免疫学方法筛选人白介素11-人血清白蛋白融合蛋白高表达菌株时,可以只使用抗HSA抗体进行一步筛选。挑选各种转化子进行摇瓶复筛和SDS-PAGE分...
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