甘草中5种活性物质对人脂肪间充质干细胞的抗衰老作用

作者：降瑞婵; 刘海亮^*

来源：同济大学学报(医学版), 2021, 42(02): 179-186.

• 甘草
• 甘草酸
• 人脂肪间充质干细胞
• 抗衰老

目的研究甘草中5种活性物质甘草酸(GA)、甘草苷(LQ)、异甘草苷(ILQ)、芹糖甘草苷(LA)和芹糖异甘草苷(ILA)对人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells, hADSCs)抗衰老效果。方法用CCK-8法测定不同浓度甘草5种活性物质对hADSCs增殖的影响,选择5种化合物的适宜浓度对hADSCs进行培养,并用Ki67染色观察其增殖能力;利用细胞衰老β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase, SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况;用细胞内活性氧类(reactive oxygen species, ROS)试剂盒检测细胞内ROS含量;采用流式细胞仪检测hADSCs细胞周期;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测p16INK4a、p53、p21 mRNA的表达,测定端粒相对长度;对hADSCs进行成脂和成骨诱导培养,并分别利用油红O和茜素红染色观察脂滴和矿化结节。最后对化合物处理后细胞进行测序分析。结果 CCK-8结果显示,甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷以及芹糖异甘草苷在hADSCs实验中适宜浓度分别是3.125、3.125、3.125、3.125、6.25μmol/L;在此浓度下,5种活性物质都能使Ki67阳性细胞数目显著增多,使β-半乳糖苷酶阳性数目显著减少;除芹糖甘草苷外能使细胞内ROS水平降低;芹糖异甘草苷能使G1期细胞比例下降;并且甘草酸、甘草苷和芹糖异甘草苷能使p16INK4a基因表达量下降,能减弱hADSCs成脂分化能力,促进细胞成骨分化能力。结论在甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖异甘草苷和芹糖甘草苷5种活性物质中,甘草酸的抗衰老效果最佳,其次是甘草苷和芹糖异甘草苷。

• 单位
  同济大学附属东方医院; 石河子大学; 生命科学学院