摘要
Ran结合蛋白1(RanBP1)的时空分布和表达量对有丝分裂纺锤体的正确组装至关重要,然而RanBP1在小鼠卵母细胞成熟过程中的作用尚不清楚。本研究通过免疫荧光技术系统地分析了RanBP1在小鼠卵母细胞以及早期胚胎中的定位,并利用显微注射技术在生发泡(GV)期卵母细胞中分别注入靶向Ranbp1的Morpholino和编码Ranbp1的mRNA实现对RanBP1表达量的下调和上调,研究RanBP1对卵母细胞成熟的影响。试验结果显示在卵母细胞以及早期胚胎中RanBP1主要弥散分布在整个细胞质中,细胞核中很少。当有纺锤体形成时,RanBP1在纺锤体区域有明显的浓集。RanBP1表达量异常的卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率降低(P<0.01),第一极体排出率降低(P<0.05)。尽管仍有高于70%的卵母细胞能够完成GVBD并成功排出第一极体,但是成熟到减数分裂Ⅱ(MⅡ)期的卵母细胞中纺锤体形态以及染色体排布异常率高于64%。纺锤体微丝减少且形态异常没有明确的规律,染色体的排布杂乱无章且出现滞后、凝集等现象,表明RanBP1表达量的异常抑制卵母细胞的成熟。该研究证实RanBP1精确的表达在小鼠卵母细胞成熟纺锤体形成以及染色体正确分裂中发挥着重要作用,为探究配子发生过程中染色体分离缺陷和克隆胚胎发育效率低的原因以及提高体细胞核移植克隆效率提供了新的依据。
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