猪流行性腹泻病毒疫苗株与野毒株PCR-HRM鉴别检测方法的建立

作者：饶丹; 丛锋; 朱余军; 练月晓; 肖丽; 黄韧; 张钰; 郭鹏举; 陈梅丽^*

来源：中国兽医学报, 2018, 38(08): 1463-1527.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.08.02

• 猪流行性腹泻病毒
• 疫苗株
• 野毒株
• PCR产物分析技术-高分辨率熔解曲线

基于新型的PCR产物分析技术-高分辨率熔解曲线(HRM),大量分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)全基因序列的特点,建立鉴别PEDV CV777疫苗株与野毒株的PCR-HRM分析方法。在ORF1保守区域设计区分引物,同时用普通的RT-PCR方法进行对比。检测19份临床样品中,PCR-HRM方法检测均为阳性且鉴定为野毒株,普通RTPCR之后凝胶电泳分析检测18份阳性,为野毒株。结果表明,PCR-HRM方法具有特异性好,灵敏度高,PCR扩增之后产物无需开盖分析,极大地避免了污染问题,是一种新型的鉴别检测方法。

• 单位
  信阳农林学院; 广东省实验动物监测所