过表达lncRNA HCG18调控miR-107/CDKN2B轴对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

作者：王明政; 金妙妙; 宋佳璐; 刘俊汝

来源：广东医学, 2023, 44(03): 312-319.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20224021

• 人类白细胞抗原复合体18
• miR-107
• 周期蛋白依赖激酶抑制因子2B
• 甲状腺癌
• 增殖

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控miR-107/周期蛋白依赖激酶抑制因子2B(CDKN2B)轴对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测60例PTC患者癌组织、癌旁组织及人正常甲状腺上皮细胞TEC及人PTC细胞WRO、TPC-1、SW579中HCG18、miR-107、CDKN2B蛋白表达；将WRO细胞分为CK组、si-NC组、si-HCG18组、pcDNA组、pcDNA-HCG18组、pcDNA-HCG18+mimic NC组、 pcDNA-HCG18+miR-107 mimic组，qRT-PCR检测各组细胞HCG18、miR-107表达；CCK-8法检测细胞增殖；划痕实验检测细胞迁移；Transwell检测细胞侵袭；Western blot检测CDKN2B、细胞周期素D1 (CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达；双荧光素酶实验验证HCG18和miR-107、miR-107和CDKN2B的关系。结果 在PTC组织和PTC细胞中，HCG18、CDKN2B蛋白低表达，miR-107高表达，且在WRO细胞中HCG18、CDKN2B蛋白水平最低，miR-107表达最高(P<0.05),因此，选择WRO细胞进行转染。与si-NC组比较，si-HCG18组HCG18、CDKN2B蛋白表达降低，miR-107表达升高(P<0.05);与pcDNA组比较，pcDNA-HCG18组HCG18、CDKN2B蛋白表达升高，miR-107表达降低(P<0.05);与pcDNA-HCG18+mimic NC组比较，pcDNA-HCG18+miR-107 mimic组HCG18表达变化差异无统计学意义(P>0.05),miR-107表达升高，CDKN2B蛋白表达降低(P<0.05);上调HCG18可抑制WRO细胞增殖、侵袭、迁移及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达，而下调HCG18则呈相反趋势；过表达miR-107可减弱上调HCG18对WRO细胞增殖、侵袭与迁移的抑制作用；HCG18与miR-107、miR-107与CDKN2B存在靶向调控关系。结论 过表达HCG18可能通过海绵化miR-107来上调CDKN2B表达，进而抑制PTC细胞增殖、迁移与侵袭。

• 单位
  金华市人民医院; 金华市中心医院