p33~(ING1b)增强骨肉瘤细胞U2OS对足叶乙甙的敏感性

作者：朱晋军; 廖威明; 李佛保; 朱孝峰; 周军民; 刘宗潮

来源：癌症, 2004, (06): 640-644.

DOI：10.3969/j.issn.1000-467X.2004.06.007

• 骨肉瘤
• p33ING1b
• 足叶乙甙
• p53
• 化疗敏感性

背景与目的:作为一个新的抑癌基因,ING1与p53有许多相似的生物学功能,如细胞生长抑制、DNA修复、凋亡和化疗敏感性等。本实验目的在于研究p33ING1b对骨肉瘤细胞药物敏感性的影响并探讨其作用机制。方法:瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,用足叶乙甙(etoposide,VP-16)处理24h,然后采用台盼蓝拒染法计数活细胞数并计算细胞生长抑制率,流式细胞仪、DAPI染色等方法检测细胞凋亡率,Westernblot技术检测p53、p21WAF1、MDM2和Bax蛋白的表达。结果:台盼蓝染色结果表明,瞬时转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24h,细胞生长抑制率明显增加(63.1±5.1)%。流式细胞计数和DAPI染色检测结果表明,细胞凋亡率明显增加(62.7%)。Westernblot检测结果显示,外源性p33ING1b高表达明显提高了p53及其下游基因p21WAF1和Bax蛋白的表达水平,转染p33ING1b进入骨肉瘤细胞株U2OS后,再用VP-16处理24h,p53、p21和Bax蛋白表达增加。在各实验组中,MDM2的蛋白表达没有明显变化。结论:p33ING1b能够上调p53蛋白,并上调p53下游因子——p21WAF1和Bax的表达水平,通过p53依赖性凋亡信号通路,提高骨肉瘤细胞U2OS对VP-16的敏感性。

• 单位
  中山大学肿瘤防治中心; 中山大学附属第一医院