核酸负载纳米金的改良ELISA高灵敏检测平台的构建

作者：程易; 马粤婷; 吴日红; 徐瑜; 杨舒凌; 王永霞^*

来源：检验医学与临床, 2022, 19(11): 1441-1445.

• 纳米金
• 纳米金生物素化DNA
• 酶联免疫吸附试验
• 免疫球蛋白E

目的 构建基于核酸负载纳米金(AuNPs)的酶联免疫吸附试验(ELISA)高灵敏检测平台。方法 将生物素化DNA通过金-硫键结合在AuNPs上，制备纳米金生物素化DNA(AuNPs@DNA-B)信号探针，在ELISA检测目标分子的基础上，使信号探针通过链霉亲和素结合于夹心复合物中的生物素化抗体上，发挥信号放大作用，实现对目标分子的高灵敏检测。该研究选用血清水平极低的抗体免疫球蛋白(Ig)E作为目标分子，验证该检测平台的可行性。结果 通过紫外光谱扫描、透射电镜观察，发现制备的AuNPs颗粒大小均匀、分散性好。在最优条件下，该方法对选定的目标分子IgE的最低检测限为0.012 ng/mL;批内变异系数<2.0%,批间变异系数<6.1%;该方法的回收率为(99.956±0.168)%～(104.733±3.376)%,传统ELISA为(99.100±0.529)%～(100.044±0.276)%,差异无统计学意义(P>0.05)。其检测灵敏度与化学发光法相近。结论 该研究成功构建了基于AuNPs@DNA-B的信号放大ELISA高灵敏检测平台。

• 单位
  海南医学院