荧光定量PCR作为猪瘟兔化弱毒疫苗效价检验替代方法的研究与应用

作者：陈锴; 姚华伟; 王长江; 徐璐; 范学政; 赵启祖; 邹兴启; 朱元源; 赵燕; 杨光友; 王琴

来源：中国农业科学, 2013, (01): 162-169.

• 猪瘟兔化弱毒疫苗
• 效价检验
• 荧光定量PCR
• TaqMan-MGB Lapinized hog cholera virus
• efficacy testing
• fluorescent quantitative PCR
• TaqMan-MGB

【目的】建立一种快速、敏感、特异的检测猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)的荧光定量PCR方法(FQ-PCR),为猪瘟兔化弱毒疫苗的效力检验提供一替代方法。【方法】在猪瘟兔化弱毒疫苗基因组3′非编码区设计一对针对猪瘟兔化弱毒株的特异性引物和一条MGB探针,并进行反应体系及反应条件优化,以及特异性、灵敏度、稳定性及符合性试验。将此方法用于部分批次疫苗厂疫苗半成品的定量检验,与兔热反应进行比较,寻求两方法的相关性。【结果】试验结果证实,CT值与模板之间呈现良好的相关性,相关系数为0.9998,扩增效率为101.14%;该方法仅扩增HCLV,不扩增HCLV以外的其它病原,显示良好的特异性;具有较高的灵敏度,...

• 单位
  新疆畜牧科学院; 四川农业大学; 中国兽医药品监察所