pVAX1-Ag85B的构建及其免疫原性的初步探索

作者：汪海龙; 张宗平; 王安果; 唐硕; 李云祥; 杨晓峰

来源：现代泌尿外科杂志, 2012, (02): 129-132.

• DNA疫苗
• pVAX1
• Ag85B
• 膀胱肿瘤 nucleotide vaccine
• pVAX1
• Ag85B
• bladder
• tumor

目的构建以Ag85B基因为基础的DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析。方法以pET28a-Ag85B基因组DNA为模板,PCR扩增获得Ag85B全长基因;将PCR产物构建成pUCm-Ag85B亚克隆;经限制性内切酶消化后克隆入pVAX1载体中构建真核表达质粒pVAX1-Ag85B,酶切、DNA测序鉴定。并将构建的DNA疫苗经肌肉免疫荷瘤小鼠,检测血清特异性抗体水平和脾淋巴细胞的增殖活性,并与BCG组、空白质粒组、生理盐水组相比较。结果经NheⅠ和HindⅢ双酶切、DNA测序鉴定后证实,Ag85B基因定向克隆入pVAX1载体,碱基无突变,序列完全正确。免疫荷瘤小鼠后,pVAX1-A...

• 单位
  山西医科大学第一医院; 南充市中心医院